实验支撑

 

Experimental Support

能量代谢检测实验服务

奥地利OROBOROS O2k已经具有33年高分辨率呼吸测量技术的研发和生产经验，目前全球已超过 1500 台仪器，分布于 50 个国家，相关应用文献接近5000篇，是生物体组织/细胞呼吸代谢检测技术全球主流厂商之一。 O2k高精度能量代谢多参数检测实验平台为您提供取样/检测/数据分析一站式实验服务 可接收实验样本：小型活体动物/活细胞/提纯线粒体/血液等 可检测的指标：基础呼吸、最大呼吸、质子漏呼吸、ATP相关呼吸、非线粒体呼吸、产酸率ECAR、各复合体呼吸功能、膜电位、ROS、钙离子、OCR、ATP产量、RCR、NO、NADH、CoQ等。 实验周期短，一周可收到实验数据

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

能量代谢包括两种主要能量代谢途径——糖酵解和细胞呼吸。
在细胞呼吸阶段形成了大量的能量，在氧化磷酸化过程中各复合体/NADH/辅酶 Q等都起到重要的作用。氧化磷酸化指标与各种疾病的密切关系
复合物 I( complex I)其功能障碍会引起细胞呼吸作用至少 40%的衰减
复合物 II( complex II)琥珀酸脱氢酶的突变和异常往往与多种疾病有关。
复合物 III( complex III)的功能缺陷将引起多种疾病。
复合物 IV( complex IV)调节氧化磷酸化、质子泵效率；又影响细胞信号传导和存活。
NADH在调节细胞代谢和能量平衡方面起着重要作用。
辅酶 Q(10)缺乏症在临床和遗传上是异质性的。

实验案例2  线粒体膜电位&耗氧率检测实验示例

 

 

 

实验样本：血小板

实验流程（部分）：通过奥地利Oroboros高精度氧化磷酸化功能表征系统对血小板线粒体功能进行表征分析，用NSA（MLKL抑制剂）预孵育组和未添加NSA的对照血小板（DMSO）组相比，耗氧率（Oxygen Consumption rate）几乎没有变化；添加凝血酶（Thrombin）后，发现NSA处理组耗氧率激增量显著低于DMSO对照组，说明MLKL促进了线粒体电子传递的作用；添加寡霉素（Oligomycin，复合体V抑制剂）后，发现NSA处理组耗氧率降低量显著低于DMSO对照组，表明NSA处理组的氧化磷酸化（OXPHOS）水平显著低于DMSO对照组，说明在NSA存在的情况下，凝血酶诱导的血小板OXPHOS功能显著受损；同时也发现添加寡霉素后，NSA处理组质子泄漏（Proton leak）水平显著高于DMSO对照组，由于质子泄漏代表不依赖于复合体V的质子驱动的氧气消耗，表明MLKL对线粒体内膜的稳定作用，抑制质子泄漏。

 

实验结果：抑制MLKL也促使受刺激血小板中线粒体氧化磷酸化和有氧糖酵解受损，同时伴有线粒体跨膜电位的破坏、质子泄漏增加、线粒体钙和ROS下降。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

可检测实验：

 

O2k高精度能量代谢多参数检测实验平台为您提供取样/检测/数据分析一站式实验服务

可接收实验样本：小型活体动物/活细胞/提纯线粒体/血液等

可检测的指标：

基础呼吸、最大呼吸、质子漏呼吸、ATP相关呼吸、非线粒体呼吸、产酸率ECAR、各复合体呼吸功能、膜电位、ROS、钙离子、OCR、ATP产量、RCR、NO、NADH、CoQ等。

实验周期短，一周可收到实验数据